研究目的：
研究強脈沖光(IPL)對載脂蛋白E敲除小鼠(ApoE-/-)瞼板腺(MGs)形態學和病理改變的間接影響，并探討IPL的作用機制。

正文內容：
實驗采用隨機對照的模式對(ApoE-/-)小鼠進行不治療和三次IPL的照射治療，通過形態學分析、眼表染色、電鏡分析以及免疫染色、Western blot和qRT–PCR檢測上瞼MGs的相關指標、基因和蛋白表達。

本文采用美迪信MDC公司研發生產的EYESIS光脈沖MGD治療儀進行實驗研究，IPL治療的強度為12 J/cm2，每兩周對兩側進行三次治療，每次1次脈沖。IPL治療應用于距離下眼瞼蓋緣3mm的皮膚，照射面積為小鼠面部1平方厘米。

實驗結果一共分為六部分來展示IPL的臨床機制
一、強脈沖光治療后瞼緣和眼表的變化：
經過三次EYESIS治療，小鼠瞼緣形態、腺口阻塞程度、瞼板腺評分、眼表染色及評分都得到了相應的改善效果。
 

二、強脈沖光改善瞼板腺口阻塞和瞼板腺形態：
IPL治療后，瞼板腺堵塞的腺口重新打開，腺體腫脹減少。為了進一步證實，實驗人員進行了H&E染色后組織學觀察顯示，IPL治療導致堵塞的孔口重新打開。
 

三、強脈沖光對瞼板腺脂質積累和線粒體超微結構的影響：
如圖所示，采用ORO染色觀察IPL治療后脂質積聚的變化。經過治療后，導致更多深染性脂質積聚在腺泡中。并且在透射電鏡下觀察發現，ApoE-/-小鼠腺泡細胞的細胞質中含有大量不規則形狀的、增大的脂質。相比較ApoE-/-小鼠的線粒體，IPL治療組的線粒體損傷減輕，排列規則。

四、強脈沖光降低促炎細胞因子水平和下調NF-κB信號通路：
結果表明，IPL治療可降低炎癥因子的水平(TNF-α、IL-17A和IL-6)，部分是通過使NF-κB途徑失活來實現的。
 

五、強脈沖光可增加腺泡基底細胞的增殖，減少導管上皮的過度角化免疫染色：
結果顯示，ApoE-/-小鼠腺泡基底層中的Ki67陽性細胞顯著減少，而IPL處理后，Ki67陽性細胞增加，并呈稀疏排列在腺泡邊緣。
 

六、強脈沖光對瞼板腺氧化應激和細胞凋亡的影響：
與ApoE-/-小鼠相比，經IPL治療的小鼠腺泡上皮細胞的NOX-4核染色減少，與WT小鼠的水平大致相同。另外，IPL降低MGs中的Caspase-3(凋亡細胞標志物)。
 

研究結果：
總之，EYESIS的光脈沖作用可以改善MGs的結構和功能，緩解MGD的發展，這可能與光生物調節(PBM)的間接作用有關。

其次，作者在文章中揭示了強脈沖光IPL的更深層作用機制，如圖所示：
 

強脈沖光IPL不僅能夠抑制瞼板腺導管上皮過度角化、增加腺泡基底細胞的增殖能力，更重要的是，IPL通過照射眼瞼組織細胞，能夠間接恢復細胞中線粒體超微結構，并下調NF-κB來降低炎癥因子水平，達到治療MGD的目的。

值得關注的是，文章中還提到了關于強脈沖光IPL照射位置的反饋，在北京大學第一醫院的研究中，EYESIS僅僅照射下眼瞼下方的皮膚，即可在上眼瞼和下眼瞼都觀察到了治療效果，這些觀察結果與MGD患者的臨床治療效果存在一致性（下圖）。
 

當然，對于這些光脈沖的獲益可能與光生物調節(PBM)的間接作用有關系。IPL的光譜包括紅色到近紅外光譜之間，雖然PBM在正常條件下會增加ROS含量，但將PBM輸送到已經處于氧化應激狀態的細胞，可誘導降低ROS濃度并抑制凋亡。

鑒于IPL的光譜特征，我們假設來自IPL的光子可能被細胞色素C氧化酶(COX)吸收，則這個過程可以增加ATP的生成并改變ROS的水平。這為今后IPL的作用機理研究提供了強有力的證據，也為IPL改善MGD的作用機制進行了更深入的剖析。